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作育基
产品说明
鼻咽癌类器官作育基是一种为增进人源鼻咽癌类器官体形状成和扩增而开发的作育基。。。 。。。它是一种无菌的液体混淆系统 ，，，，，，，，含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、生长因子、微量矿物质等。。。 。。。该作育基的奇异配方可以提供一个最尤物源鼻咽癌类器官体外作育情形 ，，，，，，，，选择性地增进体外人源鼻咽癌类器官的生长。。。 。。。
使用说明
2~8℃避光生涯1个月内有用 ，，，，，，，，-20℃避光生涯1年内有用。。。 。。。
1、鼻咽癌类器官作育
(1) 将获取的鼻咽癌原代细胞悬液计数 ，，，，，，，，凭证盘算好的体积吸收细胞悬液加入预冷的1.5mL离心管中。。。 。。。
(2) 补齐预冷的作育基至所需体积 ，，，，，，，，将预冷后的细胞悬液加入等体积的基质胶中轻轻混匀(全程冰上操作) ，，，，，，，，使得鼻咽癌原代细胞终浓度为5x106个细胞/mL。。。 。。。
(3) 然后将细胞与基质胶的混淆液凭证50μL/孔呈半球形点胶于24孔板。。。 。。。
(4) 将作育板放入5%CO2、37℃作育箱中30min ，，，，，，，，待基质胶完全凝固。。。 。。。
(5) 沿孔壁每孔缓慢加入500μL预先恢复至室温的类器官作育基 ，，，，，，，，置5%CO2、37℃作育箱作育。。。 。。。
(6) 3天后镜下视察类器官形成情形 ，，，，，，，，粒径大干30~50um即以为类器官已经形成 ，，，，，，，，每3天替换一次作育基举行作育 ，，，，，，，，一连视察类器官巨细 ，，，，，，，，镜下视察大部分类器官巨细均大于30-50um目巨细不再增大即可网络类器官举行后续实验。。。 。。。
2、鼻咽癌类器官网络
弃作育基 ，，，，，，，，每孔加入500μL预冷DF12 ，，，，，，，，重复奏乐至基质胶完全脱离板底 ，，，，，，，，网络至15ml离心管中 ，，，，，，，，1500rpm离心5min ，，，，，，，，轻轻吸去上清和基质胶层 ，，，，，，，，待用。。。 。。。
3、鼻咽癌类器官传代
(1) 网络的类器官 ，，，，，，，，加入3-5ml类器官解离试剂(PRS-ODR) ，，，，，，，，37℃ ，，，，，，，，200rpm水平摇床振荡消化(详细时间凭证类器官巨细和数目决议 ，，，，，，，，以肉眼可见颗粒显着减小一半为准 ，，，，，，，，可中心作废化的类器官显微镜视察 ，，，，，，，，类器官消化至包括3~10个细胞团块最佳)。。。 。。。
(2) 消化完全后1500rpm离心3min ，，，，，，，，弃上清 ，，，，，，，，使用洗濯液重悬后1500rpm离心3min;加入预冷的类器官作育基举行重悬 ，，，，，，，，计数 ，，，，，，，，凭证作育办法操作继续作育。。。 。。。
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货号： PRS-NCM-CR
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